利用ncbi设计引物(ncbi如何设计引物)

魏行烟
导读 大家好,小信来为大家解答以上的问题。利用ncbi设计引物,ncbi如何设计引物这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、如果同源性相当

大家好,小信来为大家解答以上的问题。利用ncbi设计引物,ncbi如何设计引物这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、如果同源性相当高,可以考虑同源克隆,在cds两端设计引物。

2、如果2000bp还可以用一般tap酶扩增。

3、如果太长了可以选在更强一些酶,也可以吧cds分成不同片段。

4、设计多组重叠引物扩增出不同的片段再拼接。

5、RT-PCR将以RNA为模板的cDNA合成同PCR结合在一起,提供了一种分析基因表达快速灵敏的方法。

6、RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。

7、在两步法RT-PCR中,每一步都在最佳条件下进行,而在一步法RT-PCR中,逆转录和PCR在同时为逆转录和PCR优化的条件下,在一只管中顺次进行。

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